Cô lập hợp chất thiên nhiên bằng phương pháp sắc kí cột

[Shadow]

Alkaloid có hoạt tính chống ung thư từ cây dừa cạn đã được nghiên cứu rất nhiều , bạn thử tìm trong thư viện khoa Hóa tài liệu về cây dừa cạn thử xem người ta làm thế nào. Tui có biết một người là cô Đoàn Thị Hồng Nhung của bộ môn Hóa hữu cơ hiện cô đang công tác ở Pháp, đề tài thạc sỹ của cô là làm về cây dừa cạn. Sinh viên khóa 03HC cũng có một nhóm đã làm nhưng không thành công vì alkaloid đó hàm lượng rất thấp,rất khó cô lập. Chỉ biết đến vậy thôi vì chưa có thời gian nghiên cứu sâu hơn nên cũng không biết là alkaloid gì
Về cách cô lập thì alkaloid do tính base của nó nên ngoài cách cô lập như các chất thông thường nó còn có quy trình cô lập riêng ( quy trình này sẽ giúp tách được các alkaloid ra khỏi các phần khác ). HPLC điều chế hiện có sử dụng đầu dò UV, nên nếu chất bạn hấp thu UV thì có khả năng có thể tách được, giá tiền là khoảng 1 triệu tùy theo mẫu ( mẫu đưa vào điều chế bằng HPLC phải tương đối sạch chứ không phải như dạng cao ban đầu ). Máy này hiện có ở phòng phân tích trung tâm ĐH KHTN, bạn có thể liên hệ với phòng để biết thêm chi tiết

[bich thuy]

Nguyên văn bởi Shadow

Alkaloid có hoạt tính chống ung thư từ cây dừa cạn đã được nghiên cứu rất nhiều , bạn thử tìm trong thư viện khoa Hóa tài liệu về cây dừa cạn thử xem người ta làm thế nào. Tui có biết một người là cô Đoàn Thị Hồng Nhung của bộ môn Hóa hữu cơ hiện cô đang công tác ở Pháp, đề tài thạc sỹ của cô là làm về cây dừa cạn. Sinh viên khóa 03HC cũng có một nhóm đã làm nhưng không thành công vì alkaloid đó hàm lượng rất thấp,rất khó cô lập. Chỉ biết đến vậy thôi vì chưa có thời gian nghiên cứu sâu hơn nên cũng không biết là alkaloid gì
Về cách cô lập thì alkaloid do tính base của nó nên ngoài cách cô lập như các chất thông thường nó còn có quy trình cô lập riêng ( quy trình này sẽ giúp tách được các alkaloid ra khỏi các phần khác ). HPLC điều chế hiện có sử dụng đầu dò UV, nên nếu chất bạn hấp thu UV thì có khả năng có thể tách được, giá tiền là khoảng 1 triệu tùy theo mẫu ( mẫu đưa vào điều chế bằng HPLC phải tương đối sạch chứ không phải như dạng cao ban đầu ). Máy này hiện có ở phòng phân tích trung tâm ĐH KHTN, bạn có thể liên hệ với phòng để biết thêm chi tiết

Mình tò mò quá. Nếu cô lập ko thành công thì thế nào? Vì đề tài tốt nghiệp ThS mà ??? Mẫu phải tương đối sạch à? Bạn có thể cho địa chỉ của TT này ko?

[Shadow]

Phòng phân tích trung tâm nằm tại trường đại học Khoa học tự nhiên đó, nó nằm ở B16 hay gì đó :) Nếu không cô lập thành công thì làm cái khác chư bít sao giờ. Mà trước khi làm phải tìm tài liệu cẩn thận đã . Mấy hôm nay bận quá không tìm giúp bạn được, vô mấy thư viện tìm thử nghe !

[lê thị dung]

Xin chào các bạn.Mình là thành viên mới của diễn đàn. Đọc các bài viết của các bạn, mình cũng muốn góp một câu trả lời và một câu hỏi.
-Khi các bạn thử trên bản mỏng mà thấy có 2 (thường chỉ 2 mới có thể được) vệt tròn, tốt nhất là các bạn không nên cố tách nữa, mà cố gắng làm sạch để trên bản mỏng chỏ còn lại 2 vết tròn như thế là quá thành công rồi, vì chất của bạn có thể là hỗn hợp 2 chất nhưng xác xuất cao nhất là hỗn hợp 2 chất đồng phân của nhau. Hiện nay, đây là một hướng nghiên cứu rất ưa thích tại viện hoá học bở vì các chất mà chúng ta có thể tách được thì có 99% là chất cũ (đã biết) do đó hỗ hợp thì quá tuyệt vời (nhưng với điều kiện là người giải phổ cho các bạn phải là người giỏi, đặc biệt là có kinh nghiệm thâm niên, chứ nếu ko sẽ làm sailệch kq.
- Hiện nay mình cũng đang rất quan tâm đến ankanoit,nhưng kỉ thuật về cột sắc kí pha đảo và các pp tách chiết ankanoit mình hoàn tàon mù tịt. Rất mong nhận được sự giúp đỡ của các bạn, đặc biệt là bạn hovietdưc. Xin cảm ơn

[merino]

Nguyên văn bởi Shadow

Không có gì đâu, là chuyên môn nên biết chút thôi. Hiện nay ngoài cách cô lập bằng sắc ký cột, nếu hợp chất quá khó tách có thể sử dụng HPLC điều chế, phương pháp này rất hay và hiệu quả chỉ có điều do sử dụng HPLC nên giá thành khá đắt ( khoảng 1M cho mỗi mẫu, hiệu suất thu hồi khoang 70% ). Seminar chuyên ngành kỳ này có một bạn làm về HPLC điều chế ( preparative HPLC ) bạn nào muốn nghe cho biết thì 15/7 có thể đến bộ môn hóa hữu cơ để nghe chơi ( nghe thui, thắc mắc gì thì hỏi nguời hướng dẫn bạn đó nha :b )

Em thấy anh Shadow nói đến vấn đề sử dụng HPLC điều chế. Xin hỏi anh địa chỉ cụ thể của nơi chạy HPLC điều chế mà anh bảo để em gửi mẫu đi tách. Hiện nay em cũng đang gặp khó khăn trong đề tài của em. Cảm ơn anh!

[ancistrocladus]

Theo mình thì nên cố gắng tách bằng các phương pháp có sẵn trong Lab của các bạn trước khi đem đi thuê chạy trên pHPLC. Thứ nhất là vì thiết bị này chưa thịnh hành ở VN và thứ hai là tốn kém. Một số điểm bạn cần cố gắng làm trước khi bó tay ngồi chờ cứu viện của các thiết bị mà bạn không có sẵn, theo tôi như sau:
-Cố gắng tách các vết ra khỏi nhau trên bản mỏng phân tích, anlytical TLC-0.25 mm , với sự khác nhau của ∆Rf ít nhất là 0.015. Khảo sát với thật nhiều hệ dung môi khác nhau vì có thể hệ này không tách nhưng sang hệ khác nó lại tách, vì để tạo ra một resolution đủ lớn thì các bạn biết rồi là nó phụ thuộc vào tính phân cực (polarity) và tính lựa chọn (selectivity factor) của hệ dung môi (còn yếu tố khác như pha tĩnh là silica gel thì đã bị cố định bởi nhà sản xuất mất rùi). Các giá trị Rf nên nằm từ 0.25 -0.55 vì trong khoảng này có sự ổn định khi chuyển sang tách trên cột silica gel (40-63 µm) với cùng 1 loại dung môi. Nếu chạy sắc ký cột nhanh FCC thì cần ∆Rf ít nhất là 0.1 thì tách mới dẽ không thì sẽ cần chạy trên cột có chiều cao và chạy chậm để tách các ∆Rf khoảng 0.03. Với các alkaloid thì người ta dùng thuốc thử Dragendoff và hay dùng hệ dung môi TCM/MeOH hoặc TCM/M/nước đôi khi cần thêm các bazo vào như là TCM bão hòa NH3 hoặc bazo hưu cơ. Để thay TCM người ta hay dùng DCM cho đỡ đôc. Như tách hiệu quả thì TCM vẫn hữu dụng hơn dù là trên TLC khoẳng cách Rf gần giống nhau, điều này là do hệ dm có TCM với hệ có DCM thể hiện tính lựa chọn khác nhau. Tính lựa chọn thể hiện rõ nhất khi tách các terpenoids đang dùng hệ dung môi H/EtOAc mà chuyển sang chạy DCM/ AC hoặc TCM/MeOH có độ phân cực tương đương (khoảng cách Rf như nhau), ở 1số ít trường hợp vết thấp chuyển vị trí cho vết cao và ngược lại, cứ như trên RP-TLC vậy.
Với các hỗn hợp phân cực như peptides, saponins, glycosides hoặc flavonoid glycoside thì khó tách hơn, người ta vẫn thích dùng TCM/MeOH/nước như 70/30/3; 30/9/1; 65/25/4; 65/35/10; BuOH/AcOH/H2O = 5/1/4; EtOAc/MeOH/H2O = 8/1/1 hoặc EtOAc/MeOH/H2O/toluene = 100/15/14/2 và rất nhiều hệ khác hiệu quả tách cao. Chúng ta chỉ cần khảo sát kỹ thì chọn được hệ dung môi thích hợp dễ tách, dễ cô cất dung môi, rẻ tiền và không độc hại.
Với các hỗn hợp nhỏ hơn 50 mg thì chay cột nhỏ từ các pipet nhỏ hoặc ai biết đổ pTLC thì càng nhanh, đưa chất lên bản mỏng và triển khai sau đó cạo ra và rửa giải trong 1 pipet nhỏ là đủ. Chỉ cần độ tinh khiết 94-95% là chạy NMR ngon lành rùi. Đôi khi hỗn hợp đồng phân 85-90 % cũng phải chịu thôi.
Cuối cùng nễu qua rất nhiều hệ dm mà vẫn không tách được trên TLC thì thôi đành test thử với RP-TLC vậy thôi. Tiếp theo là tách thử trên RP-SPE như Sep-Pak C18 trước khi dựng cột C18 lên. Nếu mà vẫn không tách được trên open ODS (Đôi khi SEPABEADS hạt nhỏ hoặc Diaion HP-20 chạy với dm MeOH/H2O hoặc Sephadex LH20 với hệ dm H/DCM/MeOH = 5/5/2; DCM/MeOH =5/5 hoặc MeOH lại có thể giải quyết được) thì đành mang ra cầu kiu pHPCL.

[bitmus]

Mình đang làm bảo vệ tốt nghiệp về nghiên cứu thành phần hóa học cây rau sam (portulaca oleracea l.)mình đã tìm ở các thư viện Quốc gia , thư viện kỹ thuật ( 24 lý thường kiệt HN) và thư viện DH Dươc HN .. nhưng chưa tìm được đề tài nào về cây này, có bạn nào biết có ai đã từng làm về cây này hay báo cáo nào về cây này có thể giúp mình không ? mình rất cảm ơn các bạn

[phucnguyen860821]

may anh chi ơi giúp em vói em đang tim hiểu về cay lục bình ( bèo tay) anh chị nào biết trong cay lục binh thì tôn tại những chất thien nhiên gì giúp em nha .......

[tb_0000]

Trên mạng và trong báo mình cũng thấy nhiều bài về cây rau sam. thường là về phần chữa bệnh. còn về khóa luận tốt nghiệp hay đề tài ở trường bạn thì mình không biết. Nếu bạn muốn tìm hiểu về cái khác ngoài việc để viết đề tài thì bạn có thể tìm trên các báo: Sức khỏe đời sống, Tạp chí dược học hoặc một số sách về dược liệu hoặc dược cổ truyền là có đó. Nhưng tài liệu khá cũ vì bây giờ cây này không mang tính thời sự như cách đây mấy năm. Hi.

[tb_0000]

Hi. Cái đó em có thể tìm hiểu trong một số sách về Cây thuốc mà. Nếu là vì mục đích tìm hiểu để thêm hiểu biết thì em nên học cách tra sách, báo và bài viết sẽ tốt hơn là đi hỏi đó. Học ở trường không quan trọng việc ta nhớ được hết bài trong sách không mà với khối lượng kiến thức lớn trong trường thì ưu tiên đầu tiên là biết cách tra cứu đó em. Cố lên nha.