Định lượng Vitamin

[Ocean]

Nguyên văn bởi tuannaphaco

Cho tôi hỏi chút bạn nvtuan
- Phương pháp phân tích A và E: Bạn đã làm thực nghiệm pp phân tích A và E như trên chưa? tôi nghe nói pp đó không làm được vitamin A dạng palmitat sao ấy. Tôi chưa làm thử nhưng 1 đồng nghiệp của tôi đã thử, anh ấy bảo chỉ làm được với dạng vitamin A acetat thôi, còn dạng palmitat thì không thấy pic đâu.

Cho tui nhiều chuyện môt chút. Vitamin A dạng nào cũng vậy, khi hòa tan mẫu dùng dung dịch NaOH, khoảng 10ml NaOH 5M cho ứng với dung dịch khoảng 1000ppm Vitamin A là ổn. Cách làm là cân khoảng 0.05 g vitamin A (hoặc lượng chất ứng với 0.05 g vit.A) cho vào bình mức, thêm NaOH, lắc khoảng 15-20 phút rồi định mức đến 100 ml với MeOH. Peak ra không những đẹp mà còn thỏa mọi yêu cầu về sắc ký. Ở đây mình đã thử với cột C18, pha động MeOH, vận tốc dòng 1 ml/min, bước sóng 235 nm. Dù là vit.A Acetate hay vit.A palmitate, dù là vit.A oily hay vit.A powder đều ra kết quả tốt cả.

Chú ý là với chất mà lượng vitamin A quá nhỏ (< 0.4 % vit.A) thì cách xử lý mẫu không giống như trên đâu nha. Tức là vẫn có thể dùng NaOH, nhưng cách chiết, tách, làm giàu mâu thì tùy mẫu và tùy hàm lượng vit.A có trong mẫu.

[tuannaphaco]

Nguyên văn bởi Ocean

Cho tui nhiều chuyện môt chút. Vitamin A dạng nào cũng vậy, khi hòa tan mẫu dùng dung dịch NaOH, khoảng 10ml NaOH 5M cho ứng với dung dịch khoảng 1000ppm Vitamin A là ổn. Cách làm là cân khoảng 0.05 g vitamin A (hoặc lượng chất ứng với 0.05 g vit.A) cho vào bình mức, thêm NaOH, lắc khoảng 15-20 phút rồi định mức đến 100 ml với MeOH. Peak ra không những đẹp mà còn thỏa mọi yêu cầu về sắc ký. Ở đây mình đã thử với cột C18, pha động MeOH, vận tốc dòng 1 ml/min, bước sóng 235 nm. Dù là vit.A Acetate hay vit.A palmitate, dù là vit.A oily hay vit.A powder đều ra kết quả tốt cả.

Chú ý là với chất mà lượng vitamin A quá nhỏ (< 0.4 % vit.A) thì cách xử lý mẫu không giống như trên đâu nha. Tức là vẫn có thể dùng NaOH, nhưng cách chiết, tách, làm giàu mâu thì tùy mẫu và tùy hàm lượng vit.A có trong mẫu.

Đúng vậy, nếu làm theo cách đó tức là chuyển nó về dạng tự do thì như nhau hết. Nhưng bạn nvtuan lại xử lý mẫu bằng etanol tuyệt đối, như vậy nó đâu có chuyển về dạng tự do được và vẫn là ở dạng muối hòa tan thôi phải không?
Theo bạn nói tức là chỉ cần lắc 15-20 phút thì tôi nghĩ không chắc đã chuyển được hết nó về dạng tự do đâu. Chỗ tôi làm thì thường phải đun hồi lưu khoảng 30phút để xà phòng hóa.