Chào bạn. Theo mình biết để thay đổi khả năng tách của HPLC ta " chỉ " có thể thay đổi các thông số sau:
1- Thay đổi pha động : thay đổi tỷ lệ pha động hay sử dụng gradient pha động để thay đổi khả năng tách.
2- Thay đổi tốc độ dòng: tốc độ dòng càng chậm -> khả năng tách càng tốt, nhưng lúc đó pic sẽ bị mập ra, cũng dễ hiểu, giả sử pic đó đáng lẽ ra khỏi đầu dò trong 1s với tốc độ 1ml/phút nhưng bạn giảm tốc độ lại 0.8 ml/phút thì độ rộng của pic phải > 1s .
3- Thay đổi cột : thông thường cột HPLC sử dụng cột C18, nhưng đối với một số nhóm chất đặc biệt phân cực thì phải dụng cột khác, như cột pha thuận, cột amid, cột C8 ( biết vậy thôi chứ đó giờ tui chỉ dùng cột C18, mấy cột khác chưa thử bao giờ
4- Sử dụng thêm một loại đệm thích hợp !
Để thay đổi khả năng tách các chất chúng ta chỉ có thể thay đổi các thông số đó thôi
Ví dụ cho dễ hiểu : có 2 chất A, B.
Ta chạy LC hệ MeOH : H2O hệ 8 : 2 -> không tách được ! ta phải làm sao giờ
-> thay đổi tỷ lệ dung môi, cụ thể là giảm khả năng giải ly của hệ bằng cách giảm MeOH -> thử hệ có lượng nước cao hơn như hệ 6 : 4 chẳng hạn :)
-> giảm tốc độ dòng cũng làm tăng khả năng tách hai pic ra
-> sử dụng đệm : tui chỉ bít một cách là thử thêm một ít acid vào thôi
Vậy đó, bạn làm thử xem. Hình như các chất kháng sinh rất khó tách, bạn thử nghiên cứu thêm tài liệu xem người ta làm thế nào mình làm theo coi ra sao.