Trích:
Nguyên văn bởi Ngoc Trang
Cám ơn bạn, mình sẽ điều chỉnh baseline. Cái cột mà mình đang dùng có mã là 1.6.9; silicagel2M. Vậy nó thể hiên điều gì hả bạn. Mình sẽ cố gắng làm theo cách của bạn xem có được không. Giúp mình với nhé.
|
Mỗi hãng máy họ sẽ tự mã hóa (code) sản phẩm cột theo ý của họ nên mình không biết loại cột đó là cột gì nữa. Nếu có thể bạn kiếm cuốn catalogue cột của Supelco (là hãng cung cấp cột sắc ký các loại lớn nhất trên thế giới) đọc xem. Trong cuốn này có đối chiếu code tương đương của hầu hết các hãng máy sắc ký. Dựa trên đó bạn sẽ biết cột của bạn sử dụng thuộc loại nào, chất nhồi cột là gì, chịu được nhiệt độ tối đa là bao nhiêu và thích hợp để chạy loại hợp chất nào (thích hợp cho mẫu trung tính, baz hay acid). Điều này rất quan trọng vì nhiều cột không được nung nóng quá 150 oC. Nếu quá nhiệt độ cho phép, cột sẽ bị hỏng! Hoặc bơm loại mẫu không thích hợp cũng có thể làm hỏng cột.
Việc chọn áp lực dòng khí (psi) cũng đóng vai trò quan trọng trong việc thu được mũi (peak) đối xứng hay không? Nếu áp suất khí quá thấp mũi hay có hiện tượng kéo đuôi (tailing) hay ngả về một bên hoặc peak rất rộng chân, nếu áp suất cao thì peak đẹp hơn nhiều nhưng hay dẫn đến hiện tượng chập mũi. Nên tùy từng loại mẫu mà bạn phải chọn áp suất phù hợp nhất và theo khả năng cho phép của cột.
Để thu được sắc ký đồ đẹp, bạn cần phải phối hợp chủ yếu giữa các yếu tố sau: chương trình nhiệt độ của oven (quan trọng nhất), tốc độ khí mang (áp suất khí), nồng độ mẫu và lượng mẫu bơm vào. Sau khi chạy máy một thời gian bạn sẽ có kinh nghiệm và biết ý máy của mình, lúc đó bạn có thể thay đổi mọi thứ theo ý của mình.
Nếu không bơm mẫu vào máy, khi chạy baseline chỉ thể hiện tạp chất có trong cột hoặc chất nhồi cột (bleeding)- hiện tượng chảy máu cột. Nếu không có mẫu mà baseline quá cao có nghĩa là cột của bạn sắp bị hỏng. Khi chạy có mẫu, baseline sẽ hạ thấp xuống. Nếu đã có mẫu mà peak ứng với cột bleeding vẫn rất rõ bạn nên chuẩn bị cột khác để thay thế. Nếu nhiệt độ bơm mẫu ban đầu quá cao hoặc tốc độ gia nhiệt nhanh sẽ có hiện tượng baseline dâng cao và sự tách mũi thường không tốt.
Napoleon có giải thích sơ về chương trình nhiệt độ.